真空離心濃縮就是采用離心機(jī)、真空和加熱相結(jié)合的方法,在真空狀態(tài)下離心樣品,并通過(guò)超低溫的冷阱捕捉溶劑,從而將溶劑快速蒸發(fā)達(dá)到濃縮或干燥樣品的目的。離心濃縮后的樣品可方便地用于各種定性和定量分析。
相對(duì)于其他濃縮方法,真空離心濃縮法的優(yōu)點(diǎn)是樣品的回收率較高,對(duì)環(huán)境的危害比較小,并且一般的真空離心濃縮儀操作較為簡(jiǎn)單,無(wú)需復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)等。
主要應(yīng)用領(lǐng)域有:
① DNA/RNA的濃縮
② 藥物代謝物的濃縮
③ 液相色譜的前后處理
④ 免疫球蛋白的濃縮等
選擇真空離心濃縮儀時(shí)應(yīng)該注意哪些事項(xiàng)呢?
1、選擇合適的真空泵
設(shè)備原理即是通過(guò)制造真空環(huán)境來(lái)降低溶劑沸點(diǎn)、使得溶劑變得容易蒸發(fā),所以,真空泵的選擇是必需的。真空泵并不是越高級(jí)越好,選擇要針對(duì)實(shí)際的實(shí)驗(yàn)情況,尤其是溶劑種類(lèi)來(lái)選擇。不同的溶劑其沸點(diǎn)與凝固點(diǎn)不同,常壓下中低沸點(diǎn)溶劑(如乙醇)和高沸點(diǎn)溶劑如DMSO對(duì)泵的要求不同。
2、真空控制功能
由于并不是所有的真空泵能針對(duì)真空離心濃縮系統(tǒng)的真空環(huán)境的變化調(diào)整泵自身的工作情況,如是否需要調(diào)整抽氣速率、是否需要泵的關(guān)與開(kāi)等,如果任由泵無(wú)限抽真空,會(huì)導(dǎo)致樣品結(jié)冰,反而降低濃縮效率;如果一味提高濃縮效率將真空值設(shè)得不夠高的話(huà),又會(huì)對(duì)樣品活性造成影響,所以為了達(dá)到理想的濃縮效果和樣品的活性,真空控制功能是第二個(gè)要考慮的因素。
3、選擇合適的主機(jī)和轉(zhuǎn)子
根據(jù)樣品量大小、盛裝樣品的容器類(lèi)型、對(duì)濃縮效率的期許和日后濃縮系統(tǒng)的拓寬和升級(jí)等諸多情況,綜合考慮蒸發(fā)面積的影響、溫度對(duì)蒸發(fā)效率的影響、合適的離心機(jī)轉(zhuǎn)子、是否需要聯(lián)用凍干機(jī)、是否需要測(cè)定樣品溫度等情況幫你選擇佳的主機(jī)。
4、是否需要冷阱?
冷阱有-55℃,-85℃和-110℃等多種溫度,主要選擇的依據(jù)是凝結(jié)什么類(lèi)型的樣品。通常,水溶液選擇-55℃冷阱,有機(jī)溶劑選擇-85℃冷阱。同時(shí),還需要根據(jù)您的樣品量大小、溶劑是否需要回收利用以及您的經(jīng)費(fèi)預(yù)算等情況綜合考慮。